Bioquímica

O roteiro como a instituição entrega

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EXPERIMENTO: Extração de DNA de frutas

Leia o arquivo: Atividade Prática – Bioquímica - Orientações Iniciais presente na Aula 7. Neste arquivo estão as instruções iniciais das atividades práticas, além de instruções para agendamento da atividade prática no Polo de Apoio Presencial.

Introdução:

Importância do DNA

O DNA é fundamental para a vida, pois contém as instruções genéticas que determinam as características e o funcionamento dos organismos. Ele é composto por duas cadeias de nucleotídeos que formam uma estrutura em dupla hélice. Cada nucleotídeo é composto por um grupo fosfato, uma molécula de açúcar (desoxirribose) e uma base nitrogenada (adenina, timina, citosina ou guanina). A sequência dessas bases ao longo da molécula de DNA codifica as informações genéticas. Durante a extração de DNA, é possível observar fisicamente essa molécula, proporcionando uma compreensão mais tangível de como a informação genética é armazenada e transmitida.

Aplicações da Extração de DNA

A extração de DNA não é apenas uma técnica utilizada em experimentos educacionais, mas também tem aplicações práticas em diversas áreas da ciência e da medicina. Por exemplo, na biotecnologia, a extração de DNA é um passo crucial para a clonagem de genes, a produção de organismos geneticamente modificados e a realização de testes de paternidade. Na medicina forense, a análise de DNA é utilizada para identificar indivíduos e resolver crimes. Além disso, a extração de DNA é essencial para pesquisas em genética, onde cientistas estudam a estrutura e função dos genes para entender doenças genéticas e desenvolver novas terapias. Portanto, essa atividade experimental não só ilustra conceitos básicos de biologia molecular, mas também destaca a relevância do DNA em contextos científicos e práticos.

Objetivo:

Extrair e observar ao microscópio o DNA extraído de duas diferentes frutas, banana e morango. Este experimento ajuda a entender a estrutura e a função do DNA, além de demonstrar como ele pode ser isolado das células.

Material necessário para realização da atividade:

• 1 banana (levar de casa)
• 3 morangos médios (levar de casa)

• 2 sacos plásticos com fecho (ZipLock) (levar de casa)

• Papel toalha (levar de casa)

• Álcool líquido gelado (70º) (levar de casa)

• 2 filtros de papel para café (levar de casa)
• 1 tesoura (levar de casa)

• 1 folha de papel sulfite A4 (levar de casa)

• 2 lâminas para microscópio (levar de casa)
• 2 lamínulas para microscópio (levar de casa)
• 1 colher de sopa (levar de casa)
• 1 colher de chá (levar de casa)
• Detergente (levar de casa)
• Sal de cozinha (levar de casa)

• 2 béqueres de 100 mL (presente no Kit Polo 18 Vidrarias)
• 1 proveta de 100 mL (presente no Kit Polo 18 Vidrarias)
• 1 bastão de vidro (presente no Kit Polo 18 Vidrarias)
• 1 funil de vidro (presente no Kit Polo 18 Vidrarias)
• 1 bandeja plástica (presente no Kit Polo 18 Vidrarias)
• 1 espátula metálica (presente no Kit Polo 18 Vidrarias)

Para limpeza dos materiais:

• 1 esponja de louça macia (levar de casa)

Preparo dos materiais (Antes da ida ao Polo)

Ao preparar o material para a ida ao Polo, deixar o etanol na geladeira para que fique gelado e tenha maior eficiência na extração do DNA. Ao levar para o Polo, acondicione em uma caixa de isopor ou em uma garrafa térmica para que permaneça gelado a maior parte do tempo possível.

O volume de etanol utilizado no experimento é de, aproximadamente, 200 mL.

Antes da ida ao Polo, também é fundamental assistir ao tutorial sobre o uso correto do microscópio, disponível em: https://vod.grupouninter.com.br/2024/JUN/10202403397.mp4 2

Experimento no Polo – Extração do DNA

• Coloque as frutas, os béqueres e os sacos plásticos dentro da bandeja plástica. Realize todo o experimento dentro da bandeja para evitar sujeira fora dela. Registre o material na bandeja através de uma foto.

_2._Separe_os_materiais a serem utilizados do “Kit Polo 18 – Vidrarias” (béquer,_proveta,_bastão de vidro, funil de vidro)

• Coloque 3 morangos (previamente lavados e secos) em um saco plástico com fecho (ZipLock). Feche o saco e esmague as frutas com o punho, tomando cuidado para não rasgar o saco plástico. Registre a fruta esmagada com uma foto.
• Após esmagar bem as frutas, abra o saco plástico e transfira o conteúdo para um béquer de 100 mL.
• Adicione ao béquer 50 mL de água, uma colher (sopa) de detergente e uma colher (chá) de sal de cozinha.
• Utilizando o bastão de vidro, mexa vagarosamente a mistura.
• Deixe em repouso por 30 minutos, mexendo com cuidado a mistura ocasionalmente.

Registre a mistura em repouso com uma foto.

• Após 30 minutos, filtre a mistura diretamente em um tubo de ensaio. O volume do filtrado deve ser um pouco menor que a metade do tubo de ensaio.
• Adicione o etanol gelado ao tubo de ensaio até dobrar o volume. A adição deve ser feita pelas paredes do tubo de ensaio, de modo que não se misturem as fases formadas.
• Aguarde 3 minutos. Registre a mistura no tubo de ensaio através de uma foto.
• Você observará a formação de uma fase alcoólica, superior, e uma fase aquosa, mais turva, no fundo do tubo de ensaio. O DNA extraído estará no fundo da fase alcoólica, precipitado.

Ou seja, o DNA ficará na forma de um aglomerado (parecido com pequenas nuvens) no meio do tubo de ensaio. Cuidado para não confundir com a pectina, que fica na superfície do líquido e tem uma aparência muito semelhante ao DNA extraído.

• Com o auxílio de um conta-gotas ou de uma pipeta, tire o DNA extraído do tubo de ensaio e coloque-o em uma lâmina de vidro (para microscópio). Cubra com uma lamínula e leve para observar ao microscópio. Registre o que observou na lâmina através de uma foto ou desenho para acrescentar ao relatório.
• Repita a extração do DNA utilizando metade de uma banana ao invés dos morangos.

Observe, também, o DNA extraído no microscópio.

Utilize o arquivo “Relatório das atividades práticas” com o modelo de relatório para responder às perguntas relacionadas às práticas. Não esqueça de inserir as fotos registrando o experimento no documento a ser entregue. Lembre-se que você deve, necessariamente, aparecer nas fotos

manuseando as vidrarias (“selfie”).